1　毒种 与A1项相同。 2　细胞 2.1　细胞株 用于疫苗生产的人二倍体细胞株必须不含外源因子，核型正常，对病毒敏感。可用KMB-17、2BS等株。所用细胞株须经卫生部批准。 2.2　原始细胞种子批 一个细胞种子批，应有足够量的早世代细胞，分装安瓿保存于液氮中。 2.3　生产用细胞种子批 用一个或多个安瓿细胞种子，传代繁殖到适宜世代，具有一定量的均一细胞，分装安瓿，冻存于液氮中。 2.4　生产用细胞种子批检定 按《人二倍体细胞建株、检定及制备疫苗规程》要求进行。 3　疫苗制备 3.1　细胞培养 从生产用细胞种子开始培养，以适宜分种率连续传代，直至累积足够量的细胞培养物。用于生产的细胞代次应在整个生命周期的前2/3代次内。 3.2　病毒接种、培养与收集 与A2.2项相同。 3.3　病毒液合并 与A2.3项相同。 3.4加氯化镁与分批 与A2.4项相同。 3.5　分装 与A2.5项相同。 4　检定 4.1　生产用人二倍体细胞外源因子检查 于种毒当天，每批细胞留取2%～5%不种毒，换液作为正常细胞对照，以检查外源因子。从接种之日起，观察2周，其形态不应有改变。 于种毒0～2天，对照细胞上清液接种原代幼兔肾、非人灵长类传代细胞及另一株人二倍体细胞。接种的样品量应占维持液的20%以上，观察14天。种毒后5～8天用上述细胞盲传一代，传代后观察14天，应无细胞病变。 在种毒时，用0.5%鸡、豚鼠混合红细胞在4～8℃和20～25℃做血吸附试验，检查对照细胞。 4.2细胞鉴别试验 在生产用细胞水平世代或其后数代，作中期细胞染色体检查，粗数300个细胞，细数100个细胞，其核型应正常。以鉴别确为生产用细胞无误。 4.3　病毒液检定 4.3.1　外源因子检查 样品以脊髓灰质炎病毒型特异性抗体（非人源抗体，该抗体不能用猴制备，免疫用的抗原不能用生产用的细胞制备）或单克隆抗体中和，中和物（可稀释，但稀释度不应超过1∶4）接种对麻疹病毒敏感的细胞和另一株人二倍体细胞，并留取正常细胞对照，37℃培养观察2周。观察期间由于非特异原因废弃的细胞瓶数应少于20%。如发生任何因外源因子引起的细胞病变，则该批病毒液应废弃。 4.3.2　无菌试验及支原体检查 与A3.2.2项相同。 4.3.3　病毒滴定 结果判定蚀斑法为4～6天，其他同A3.2.3项。 4.3.4　型特异性检定 与A3.2.4项相同。 4.3.5　猴体试验 与A3.2.6项相同。 4.3.6rct特征试验 与A3.2.7项相同。 4.4　成品检定 与A3.3项相同。 5　保存与效期 与4项相同。